一、GIBCO, DMEM/F-12血清? ?概(gai)述

    采用正常人血液(ye)為原料，經無(wu)(wu)(wu)(wu)菌采集、分離(li)、微孔過濾后而成。本產品無(wu)(wu)(wu)(wu)支原體(ti)、無(wu)(wu)(wu)(wu)病毒(du)、無(wu)(wu)(wu)(wu)噬(shi)毒(du)體(ti)、內毒(du)素含量低于1EU/ml，適用于細(xi)胞、組織器(qi)官培養(yang)(yang)、細(xi)胞株保藏、單(dan)抗研制(zhi)，是醫(yi)院(yuan)、科研院(yuan)校、動(dong)物疫苗(miao)、生(sheng)物制(zhi)藥廠家重(zhong)要(yao)培養(yang)(yang)基之一。

主要(yao)成分(fen)分(fen)析
    由(you)血(xue)漿去除(chu)纖(xian)維(wei)蛋(dan)白(bai)原而形成(cheng)(cheng)(cheng)的(de)一種很(hen)復雜的(de)混(hun)合物(wu)，其組成(cheng)(cheng)(cheng)成(cheng)(cheng)(cheng)份雖大部分(fen)(fen)已知，但還有(you)(you)一部分(fen)(fen)尚不(bu)(bu)清(qing)(qing)(qing)楚，且血(xue)清(qing)(qing)(qing)組成(cheng)(cheng)(cheng)及(ji)含量常隨供血(xue)動物(wu)的(de)性別、年齡、生(sheng)(sheng)理(li)條件(jian)和(he)營養條件(jian)不(bu)(bu)同而異(yi)。血(xue)清(qing)(qing)(qing)是血(xue)漿中不(bu)(bu)含纖(xian)維(wei)蛋(dan)白(bai)原的(de)膠(jiao)狀液體,具有(you)(you)維(wei)持血(xue)液的(de)正(zheng)常粘度、酸(suan)堿度、滲(shen)透壓等(deng)作用。它主要由(you)水和(he)各種化(hua)學成(cheng)(cheng)(cheng)分(fen)(fen)組成(cheng)(cheng)(cheng),這些化(hua)學成(cheng)(cheng)(cheng)分(fen)(fen)包(bao)括白(bai)蛋(dan)白(bai)、α1、α2、β、γ-球蛋(dan)白(bai),甘油三酯,總膽固醇(chun),谷丙(bing)轉氨酶等(deng)。血(xue)清(qing)(qing)(qing)中含有(you)(you)各種血(xue)漿蛋(dan)白(bai)、多肽、脂(zhi)肪、碳水化(hua)合物(wu)、生(sheng)(sheng)長(chang)因子、激素、無機物(wu)等(deng)，這些物(wu)質對促進細胞(bao)生(sheng)(sheng)長(chang)或抑制生(sheng)(sheng)長(chang)活性是達到生(sheng)(sheng)理(li)平衡的(de)。
二(er)、注意(yi)事項
1、如何解凍血清才不會使產品質量受損？
    將血清從冷(leng)凍箱(xiang)取出后，先(xian)置于(yu)2-8C冰箱(xiang)使(shi)之溶(rong)解，然后在(zai)室溫下使(shi)之全溶(rong)。但(dan)必須注意的(de)是，溶(rong)解過程中必須規則地搖晃均勻(yun)如何避(bi)免(mian)沉(chen)淀物(wu)的(de)產生?
解凍血清時，請按照所建議(yi)的逐步解凍法(-2O。C至4。C至室(shi)溫)，若(ruo)血清解凍時改變的溫度太(tai)大(da)(如-20。C至37。C)，實驗(yan)顯示非常(chang)容易產生(sheng)沉淀(dian)物。
2、解凍血清時，請隨時將之(zhi)搖晃(huang)均(jun)勻，使溫度及成分均(jun)一(yi)，減少沉淀的發生
3、請勿(wu)將(jiang)血(xue)(xue)清置(zhi)于37。C太久。若在37。C放置(zhi)太久，血(xue)(xue)清會變得(de)混濁，同時(shi)血(xue)(xue)清中許多較不穩定(ding)的成分也會因(yin)此(ci)受到損害，而影響血(xue)(xue)清的質(zhi)量。
4、保存(cun)方法
    血(xue)清(qing)應(ying)保(bao)存在-5C至-2OC。然而，若(ruo)(ruo)存放于(yu)4C時，請勿(wu)超過一(yi)個月。若(ruo)(ruo)您一(yi)次無法(fa)用完一(yi)瓶(ping)，建議將(jiang)無菌分裝血(xue)清(qing)至恰當的滅菌容器內，再放回冷凍。
三、操作問題
如何(he)避(bi)免(mian)沉淀物的產生?
1、解凍(dong)血清時，請按照所建議的(de)逐步解凍(dong)法(-2O。C至4。C至室(shi)溫(wen))，若(ruo)血清解凍(dong)時改變的(de)溫(wen)度太大(da)(如-20。C至37。C)，實(shi)驗顯示非常容易產生(sheng)沉淀物。
2、解凍血清(qing)時，請隨時將之(zhi)搖晃均勻，使溫度及成分(fen)均一，減少(shao)沉淀的(de)發生
3、請勿將血(xue)清(qing)(qing)置(zhi)于37。C太(tai)久。若(ruo)在37。C放置(zhi)太(tai)久，血(xue)清(qing)(qing)會變得混濁，同時血(xue)清(qing)(qing)中許多較不穩定的(de)成(cheng)分(fen)也會因此(ci)受(shou)到損害，而影(ying)響(xiang)血(xue)清(qing)(qing)的(de)質(zhi)量。
4、血清的熱滅活非(fei)常(chang)容易造成沉淀物的增多，若(ruo)非(fei)必(bi)要，可以無須做此(ci)步驟(zou)。
5、若必須做血清(qing)(qing)的熱滅活(huo)，請遵守(shou)56。C，30分鐘的原則，并(bing)且隨時搖晃均(jun)勻。溫度過(guo)(guo)(guo)高，時間過(guo)(guo)(guo)久或搖晃不均(jun)勻，都會造成沉(chen)淀物(wu)的增多。血清(qing)(qing)解凍后發(fa)現有絮狀(zhuang)沉(chen)淀物(wu)出(chu)現，該如何處理?　欲(yu)去(qu)除這些絮狀(zhuang)沉(chen)淀物(wu)，可以將血清(qing)(qing)分裝(zhuang)至無菌離心(xin)管內，以400g稍微離心(xin)，上清(qing)(qing)液即(ji)可接著(zhu)加入培養基內一起過(guo)(guo)(guo)濾。但不建議以過(guo)(guo)(guo)濾的方法(fa)去(qu)除這些絮狀(zhuang)沉(chen)淀物(wu)，因(yin)為它可能會阻塞過(guo)(guo)(guo)濾膜。

四(si)、操作流(liu)程
采 血：胎牛血清(qing)采用心臟穿刺的方法采血。馬血清(qing)采自供體動物。新生(sheng)牛血清(qing)采自出生(sheng)10至14天的小牛。全(quan)部按照(zhao)工業標準采血。
處(chu) 理：
全部血清(qing)：收集的血液(ye)均(jun)在冷藏(zang)條件下(xia)處(chu)理。血清(qing)和凝塊分離后立即將血清(qing)合并(bing)并(bing)冷凍。只(zhi)有符合我(wo)們的檢測標(biao)準的血清(qing)才被接受(shou)作進一(yi)步(bu)處(chu)理。
熱滅活血(xue)清：熱滅活是在56℃水浴中嚴格控溫30分鐘(zhong)。
操(cao)作實(shi)驗中，血清有必(bi)要做熱滅活嗎?
實驗顯示，經過正確處(chu)(chu)理的(de)(de)熱滅(mie)活血清，對大多數的(de)(de)細胞(bao)而(er)言是不(bu)需要(yao)的(de)(de)。經此(ci)處(chu)(chu)理過的(de)(de)血清對細胞(bao)的(de)(de)生長(chang)只有微小的(de)(de)促(cu)進，或*沒有任何作用，甚至通常(chang)因(yin)為高溫處(chu)(chu)理影響了血清的(de)(de)質量，而(er)造成(cheng)細胞(bao)生長(chang)速率(lv)的(de)(de)
降低(di)。而(er)經過熱處理的(de)血清，沉淀物的(de)形成(cheng)會(hui)顯著(zhu)的(de)增多，這些(xie)沉淀物在(zai)倒立顯微鏡下(xia)觀察，像是"小黑點"，常常會讓研(yan)究(jiu)者(zhe)誤(wu)以為(wei)是血(xue)清(qing)遭受污染，而把血(xue)清(qing)放(fang)在37C環境中，又會使(shi)此(ci)沉(chen)淀(dian)物更增(zeng)多，使(shi)研(yan)究(jiu)者(zhe)誤(wu)認為(wei)是微(wei)生物的(de)(de)分(fen)裂(lie)擴增(zeng)。因此(ci)我們建議您(nin)(nin)(nin)，若非必須，您(nin)(nin)(nin)可(ke)以不需(xu)要做熱處(chu)理這一步。如此(ci)一來(lai)，不但節省您(nin)(nin)(nin)寶貴的(de)(de)時(shi)間(jian)，更確保(bao)您(nin)(nin)(nin)血(xue)清(qing)的(de)(de)質量!

另外，購買(mai)已滅(mie)活成(cheng)品(pin)也不失一個捷(jie)徑(jing)，請(qing)在購買(mai)的(de)時候注意詢問廠(chang)家是(shi)否是(shi)已滅(mie)活血清(qing)要作(zuo)用
解凍血(xue)清時，請按照所建(jian)議(yi)的逐步解凍法(-2O。C至4。C至室溫(wen))，若血清解凍(dong)時改變(bian)的(de)溫(wen)度太大(如-20。C至37。C)，實驗顯示非常容(rong)易產生沉淀(dian)物。
五(wu)、GIBCO, DMEM/F-12血清相關產(chan)品推薦