【產品名(ming)稱】：GH,豬生長因子ELISA試劑盒技術指導

【檢測方法】：酶聯(lian)免疫法/酶免法(ELISA)

【產(chan)品性狀】：96T，盒(he)裝(zhuang)液體

【貯    藏】：2-8°C

【有 效(xiao) 期】：Elisa試劑盒二(er)年，我公司Elisa試劑盒均(jun)為(wei)批次，可放心購買。

【主(zhu)要成分(fen)】：酶標板(ban),試劑,標準品等。

【標    本】：血清/血漿(jiang)/細胞(bao)培養(yang)上清液/組織勻漿(jiang)/組織液/尿液/分泌物

【質(zhi)量(liang)承(cheng)諾】：我們堅持(chi)對產品質(zhi)量(liang)作不斷的(de)評(ping)估、創新和改(gai)善以確(que)保您對我們產品的(de)高度信(xin)任。

【待檢樣本(ben)】：體液(ye)、血(xue)清、血(xue)漿、細胞培養上清液(ye)、尿液(ye)、組(zu)織勻漿、心房水標本(ben)等

【樣(yang)品(pin)采集】：Elisa試劑盒收(shou)集標(biao)本前必須清楚要檢(jian)(jian)測的成份是(shi)否足夠穩定。對收(shou)集后當天(tian)進行檢(jian)(jian)測的標(biao)本，儲(chu)存(cun)在(zai)4℃備用，如有特殊原(yuan)因需要周期收(shou)集標(biao)本，將標(biao)本及時(shi)分裝(zhuang)后放在(zai)-20℃或-70℃條件下(xia)保存(cun)。避(bi)免反復凍融。標(biao)本2-8℃可(ke)保存(cun)48小時(shi)，-20℃可(ke)保存(cun)1個月。-70℃可(ke)保存(cun)6個月。部(bu)分激素類標(biao)本需添(tian)加抑肽酶。

【保 質 期(qi)】：半年(六(liu)個月)

一、“GH,豬生長因子ELISA試劑盒技術指導”特點(dian)概述

1.專(zhuan)一性(xing)強(qiang)。抗原(yuan)與(yu)抗體(ti)的(de)免(mian)疫(yi)(yi)反應(ying)(ying)是專(zhuan)一反應(ying)(ying)，而免(mian)疫(yi)(yi)酶技術以免(mian)疫(yi)(yi)反應(ying)(ying)為基礎(chu)，所檢測(ce)的(de)對象是抗原(yuan)(或抗體(ti))，使用的(de)抗體(ti)除標記(ji)了酶以外(wai)，與(yu)普通抗體(ti)的(de)免(mian)疫(yi)(yi)反應(ying)(ying)特性(xing)并無多大(da)差別。

2.靈敏(min)度高。由于抗體(ti)(ti)(ti)聯結上了酶(mei)(mei)，因(yin)此，借助于酶(mei)(mei)與(yu)底物的顯(xian)色反應，顯(xian)示(shi)抗原與(yu)抗體(ti)(ti)(ti)的結合(he)，大大提(ti)高了檢(jian)測的靈敏(min)性，使(shi)檢(jian)測水平接近放射免疫測定(ding)法。

3.樣品(pin)易保存(cun)。經(jing)過酶反應(ying)顯示的有色產物大多比較(jiao)穩定，因此(ci)有利于(yu)樣品(pin)的保存(cun)。

4.結果易觀察(cha)。對檢測結果即(ji)可(ke)(ke)用(yong)肉眼觀察(cha)，又可(ke)(ke)用(yong)顯微鏡觀察(cha)，也可(ke)(ke)以用(yong)分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計進行比色測定，還可(ke)(ke)用(yong)顯微鏡觀察(cha)。這是因(yin)為某些酶反(fan)應產物能使(shi)電子(zi)密度發生(sheng)改變(bian)，從而引起被檢測物的顯示(shi)。

5.可以(yi)定量(liang)測定。溶液中的(de)抗(kang)原物(wu)質，應(ying)用酶(mei)免(mian)吸附技術進(jin)行比(bi)色測定，依據光密度值的(de)變化，可以(yi)定量(liang)。預計用細(xi)胞分光光度計可對(dui)組織內的(de)抗(kang)原進(jin)行免(mian)疫(yi)酶(mei)技術的(de)定量(liang)測定。

6.可以大規模測定(ding)樣品(pin)。如有成千(qian)上萬(wan)份(fen)樣品(pin)需要進行(xing)檢測，免疫酶技術都能(neng)在較短(duan)時間內完(wan)成。

7.儀(yi)器(qi)和試劑簡單。對免疫沒(mei)技(ji)術來說(shuo)，不需要熒光(guang)顯(xian)微鏡，也不需要測(ce)定放射(she)性的特(te)殊儀(yi)器(qi)，所(suo)用儀(yi)器(qi)及試劑均屬一般(ban)性儀(yi)器(qi)與(yu)試劑，普通實(shi)驗(yan)室(shi)及生產應用單位(wei)均易購置

6、*，質(zhi)量保證(zheng)，最大(da)限度的節省(sheng)實驗經費(fei)。

二、ELISA試劑盒檢測概述
    ELISA（酶聯接免疫吸附反應分析）是以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的實驗技術。 由于抗原、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結果的特異性與穩定性。
實際應用中，通過不同的設計，具體的方法步驟可有多種。即：用于檢測抗體的間接法、用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。目前我們對客戶提供比較常用的ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法服務。
三、實驗過程：

1.  試劑準備：所有(you)試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按(an)照說明書要(yao)求保存(cun)試劑。  實(shi)驗操作中(zhong)請使用一次性的吸頭(tou)，避(bi)免交叉(cha)污(wu)染。

2.   加(jia)樣(yang)：加(jia)樣(yang)或加(jia)試劑時(shi)，請注意(yi)在吸取(qu)標本(ben) / 標準品(pin)，酶結(jie)合物或底物時(shi)，*個(ge)孔(kong)(kong)與最(zui)后一個(ge)孔(kong)(kong)加(jia)樣(yang)之間的(de)(de)時(shi)間間隔如果太大，將會導致不同(tong)的(de)(de) “預孵育(yu)"時(shi)間，從(cong)而(er)明顯地(di)影響(xiang)到測量(liang)值(zhi)的(de)(de)準確性及重復性。一次加(jia)樣(yang)時(shi)間(包括(kuo)標準品(pin)及所(suo)有樣(yang)品(pin))控制在10分鐘內，如標本(ben)數量(liang)多(duo)，推薦使用多(duo)道移液器加(jia)樣(yang)。

3.   孵育(yu)：為防止樣(yang)品蒸(zheng)(zheng)發，試(shi)驗時(shi)(shi)將反(fan)應板(ban)放于(yu)(yu)鋪有濕布的密(mi)閉盒內，酶(mei)標板(ban)加上蓋或覆膜，以避免液體(ti)蒸(zheng)(zheng)發；洗板(ban)后應盡快進行(xing)下步操(cao)作，任何時(shi)(shi)侯(hou)都(dou)應避免酶(mei)標板(ban)處于(yu)(yu)干燥(zao)狀態(tai);同時(shi)(shi)應嚴格(ge)遵守(shou)給定的孵育(yu)時(shi)(shi)間和溫(wen)度。

4.   洗滌(di)：洗滌(di)過程中(zhong)反(fan)應孔(kong)中(zhong)殘(can)留的洗滌(di)液(ye)應在濾紙上充分拍干(gan)，勿將濾紙直接放入反(fan)應孔(kong)中(zhong)吸水，同時要消除板底殘(can)留的液(ye)體(ti)和手(shou)指(zhi)印，避免影響最后的酶(mei)標儀讀數。

四(si)、常見問題解答(da)

小編簡單整(zheng)理了5個問題，具體內容(rong)如(ru)下(xia)：

1、一個(ge)ELISA試劑(ji)盒檢測(ce)幾個(ge)樣品？

小編自己(ji)在(zai)各大論壇看(kan)到最(zui)多的(de)三個答(da)案：

1）48T 可做(zuo)42個(ge)樣本加6個(ge)標準曲(qu)線；96T 可做(zuo)90個(ge)樣本加6個(ge)標準曲(qu)線

2）以96T試(shi)(shi)劑(ji)盒(he)來(lai)算，定量的試(shi)(shi)劑(ji)盒(he)一般(ban)可以做(zuo)(zuo)90個左右的樣品，定性的試(shi)(shi)劑(ji)盒(he)可以做(zuo)(zuo)94個左右的樣品

3）96T的(de)ELISA試劑盒(he)，去除(chu)標準品復孔檢(jian)測，最(zui)多還能(neng)檢(jian)測80個(ge)標本(ben)；48T的(de)最(zui)多30個(ge)樣(yang)本(ben)。

2、elisa試劑盒(he)96T的能做檢測(ce)多少血清樣品？板能重(zhong)復利用嗎(ma)？

96T，一(yi)(yi)般做(zuo)(zuo)復孔(kong)的話，做(zuo)(zuo)標準曲(qu)線需要(yao)16個孔(kong)，剩下80個孔(kong)就可(ke)以做(zuo)(zuo)40個樣本。這個板(ban)不能(neng)重復利用(yong)(yong)。而且(qie)配套(tao)的試劑也只是夠(gou)一(yi)(yi)塊板(ban)子用(yong)(yong)的。

3、想(xiang)請(qing)教一(yi)(yi)下，我想(xiang)用(yong)elisa法測(ce)血(xue)清里的(de)(de)一(yi)(yi)種(zhong)(zhong)(zhong)抗原，查了資(zi)料，發現沒有(you)(you)現成的(de)(de)試(shi)劑盒(he)用(yong)，現在就有(you)(you)2種(zhong)(zhong)(zhong)備選方案(an)，一(yi)(yi)種(zhong)(zhong)(zhong)是買抗體(ti)對自己(ji)包被（查了R&D等大公司都沒有(you)(you)可(ke)用(yong)于elisa的(de)(de)單抗）。哪種(zhong)(zhong)(zhong)比較好呢(ni)？自己(ji)包被的(de)(de)會(hui)(hui)不會(hui)(hui)比國(guo)產的(de)(de)試(shi)劑盒(he)可(ke)靠(kao)呢(ni)？

如果(guo)你覺(jue)得技術(shu)不錯有隊其他公司(si)不放(fang)心，可以自(zi)己(ji)購買抗體對自(zi)己(ji)包被(bei)，這個就是麻煩點(dian)，自(zi)己(ji)包被(bei)用(yong)著放(fang)心，舒心；

4、western 和ELISA 處理樣本有何(he)差別？

Western Blot 樣(yang)品(pin)制(zhi)(zhi)備要加(jia)蛋白裂(lie)解(jie)液（含(han)有蛋白酶抑制(zhi)(zhi)劑），然后(hou)冰上(shang)(shang)研磨(mo)，收集于(yu)EP管，冰上(shang)(shang)裂(lie)解(jie)30min，4度12000rpm離心(xin)15min，取(qu)上(shang)(shang)清分裝(zhuang)，即得(de)到蛋白樣(yang)品(pin)。建議直接(jie)電泳(yong)，多余的-80保存。建議分裝(zhuang)的蛋白每支(zhi)略多于(yu)一次上(shang)(shang)樣(yang)量(liang)，一次性用完一支(zhi)，避免(mian)反(fan)復凍融(rong)。

ELISA樣品，直接腦(nao)組(zu)織冰上勻(yun)漿，收集于EP管(guan)，同上一樣離心，大(da)約220-250ul每支分裝（因為ELISA上樣量基本(ben)都是每孔(kong)100ul，做復孔(kong)，每個樣品2孔(kong)，就(jiu)需(xu)要200ul，為了(le)避免不夠2孔(kong)，分裝時要大(da)于200ul每支），直接實(shi)驗(yan)。多余的-80保存(cun)，一樣避免反復凍融。

不(bu)過ELISA少量(liang)樣(yang)品進行預實驗，或者查(cha)閱文(wen)獻，看看大概組織里有多高濃(nong)度(du)(du)，選擇(ze)合(he)適的試劑盒(he)，測量(liang)范圍要與(yu)組織濃(nong)度(du)(du)相符(fu)。避免濃(nong)度(du)(du)過高測量(liang)不(bu)準(zhun)，或者濃(nong)度(du)(du)過低，小于試劑盒(he)zui低可測濃(nong)度(du)(du)。

5、Elisa試(shi)劑(ji)盒該買哪家公司的(de)呢？

提出這個(ge)問(wen)題的(de)(de)朋友(you)其(qi)實該打，目前國際上(shang)各個(ge)品牌(pai)的(de)(de)試劑盒生廠商(shang)，都(dou)會有(you)其(qi)偏重點，像BIM、R&D等品牌(pai)在(zai)細胞因子(zi)方面(mian)的(de)(de)試劑盒就非常(chang)好，而其(qi)他牌(pai)子(zi)也一樣的(de)(de)。

Bender：粘附分子方面的試(shi)劑盒(he)；

Cayman：花(hua)生四烯酸類(lei)產品(pin)的試劑盒(he)；

Merck(Linco)：內(nei)分(fen)泌研(yan)究方面的(de)試劑盒；