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上海恒遠邀您來看ELISA測定結果分析方案

更新時間:2018-12-12   點擊次數:1140次

    日前上午,我公司錢經理收(shou)到(dao)浙江大學鄭(zheng)老師發來的(de)qq會話 。鄭(zheng)老師表示:ELISA試劑盒的(de)檢測(ce)結(jie)果不理(li)想,不知道是哪里出了問題。幫我(wo)看下是什么(me)(me)原因(yin),我(wo)自己(ji)合成8個(ge)氨基酸(suan)的(de)抗(kang)(kang)原短肽(tai)(tai),和BSA耦(ou)連后(hou)免疫(yi)動(dong)物,1個(ge)月后(hou)用ELISA測(ce)定血清(qing)(qing)(qing)中針對抗(kang)(kang)原短肽(tai)(tai)的(de)抗(kang)(kang)體滴度(du),具體步驟:用碳酸(suan)緩(huan)沖液溶解抗(kang)(kang)原短肽(tai)(tai)后(hou)包(bao)板(ban),4度(du)冰箱18小(xiao)(xiao)時(shi), 再用1%OVA37度(du)封(feng)閉2小(xiao)(xiao)時(shi),洗板(ban)3次(ci)。待測(ce)血清(qing)(qing)(qing)用10%小(xiao)(xiao)牛血清(qing)(qing)(qing)倍比(bi)稀 釋,37度(du)溫(wen)育(yu)1小(xiao)(xiao)時(shi),洗板(ban)3次(ci),加入二抗(kang)(kang),37度(du)溫(wen)育(yu)40分鐘(zhong),洗板(ban)3次(ci) ,加TMB顯色,結(jie)果比(bi)較詭異,陰(yin)性對照也(ye)顯色了,且OD值和陽性差別不大(da)。是什么(me)(me)原因(yin)呢?是洗板(ban)的(de)問題嗎?


    錢經理將問題轉至技術部,上海恒遠生物公司專業技術員回應, ELISA結果不理想原因可以根據這幾個方面分析:
    1.洗板是否串孔,如串孔的話可能造成污染;你一抗、二抗 每次洗板時洗5遍以上。
    2.封閉液的問題,你說陰性對照也顯色了,那主要的問題應該是封閉,應重新考慮用OVA封閉是否適合,如果OVA封閉效果不好的話 可以選擇其他的封閉液。封閉液的選擇園子里有很多相關的帖,你搜一下看看。
    3.建議ELISA試劑盒包被在37度兩小時,這樣的效果可能會好 一些。


    上海恒遠生物(wu)公司為(wei)您提供(gong)BIM、R&D、TSZ品牌ELISA試劑盒,制備齊全,種屬涉及人(ren)、大鼠、小(xiao)鼠、豬、雞(ji)、植物(wu)等。保(bao)證質量,*,提供(gong)全程技術指導服(fu)務,歡迎您致電我司錢經(jing)理(li)咨詢(xun)。