Elisa試劑盒詳細(xi)資料

中(zhong)文名稱：Tn-T,大鼠(shu)肌鈣蛋白(bai)ISA試劑盒說明(ming)書

組織標(biao)(biao)本：切割(ge)標(biao)(biao)本后(hou)，稱取(qu)重量(liang)。加入一定量(liang)的PBS，PH7.4。用(yong)(yong)液氮迅速冷(leng)(leng)凍保存備用(yong)(yong)。標(biao)(biao)本融化(hua)后(hou)仍然(ran)保持2-8℃的溫(wen)度(du)。加入一定量(liang)的PBS(PH7.4)，用(yong)(yong)手工(gong)或(huo)勻漿器將(jiang)標(biao)(biao)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔(zi)細(xi)收(shou)集上(shang)清。分裝后(hou)一份待檢(jian)測，其余冷(leng)(leng)凍備用(yong)(yong)。標(biao)(biao)本采集后(hou)盡(jin)早(zao)進(jin)(jin)行(xing)提取(qu)，提取(qu)按相(xiang)關文獻進(jin)(jin)行(xing)，提取(qu)后(hou)應盡(jin)快進(jin)(jin)行(xing)實驗。

規    格：96T/48T

性    狀(zhuang)：液(ye)體(ti)(ti)

保(bao)    存(cun)：2-8℃

有 效 期：6個月

實驗原(yuan)理

用純(chun)化(hua)的(de)(de)抗(kang)體包(bao)(bao)被微孔板(ban)，制(zhi)成(cheng)固相載體，往包(bao)(bao)被抗(kang)該(gai)(gai)指標(biao)(biao)(biao)(biao)抗(kang)體的(de)(de)微孔中(zhong)依次(ci)加入標(biao)(biao)(biao)(biao)本或標(biao)(biao)(biao)(biao)準品、生物素(su)(su)化(hua)的(de)(de)抗(kang)該(gai)(gai)指標(biao)(biao)(biao)(biao)抗(kang)體、HRP標(biao)(biao)(biao)(biao)記的(de)(de)親和素(su)(su)，經過*洗滌后用底物TMB顯色(se)(se)。TMB在過氧化(hua)物酶的(de)(de)催化(hua)下轉化(hua)成(cheng)藍色(se)(se)，并在酸的(de)(de)作用下轉化(hua)成(cheng)zui終的(de)(de)黃色(se)(se)。顏色(se)(se)的(de)(de)深淺和樣品中(zhong)的(de)(de)該(gai)(gai)指標(biao)(biao)(biao)(biao)呈正相關。用酶標(biao)(biao)(biao)(biao)儀在450nm波長(chang)下測定吸光(guang)度(OD值(zhi))，計算(suan)樣品濃度。

類型
　　ELISA可(ke)用(yong)于(yu)測(ce)(ce)定(ding)(ding)抗(kang)原，也可(ke)用(yong)于(yu)測(ce)(ce)定(ding)(ding)抗(kang)體(ti)。在(zai)這(zhe)種(zhong)測(ce)(ce)定(ding)(ding)方法中有三個必要(yao)的(de)試劑：（1）固相的(de)抗(kang)菌素原或(huo)抗(kang)體(ti)，即"免疫(yi)吸(xi)附劑"（immunosorbent）；（2）酶(mei)標記(ji)的(de)抗(kang)原或(huo)抗(kang)體(ti)，稱為"結合物(wu)"（conjugate）；（3）酶(mei)反應(ying)的(de)底物(wu)。根據試劑的(de)來源(yuan)和(he)標本(ben)的(de)情況(kuang)以及檢(jian)測(ce)(ce)的(de)具體(ti)條件，可(ke)設計出各種(zhong)不同類型(xing)的(de)檢(jian)測(ce)(ce)方法。用(yong)于(yu)臨(lin)床檢(jian)驗(yan)的(de)ELISA主要(yao)有以下幾種(zhong)類型(xing)：

              捕獲包被法測抗體

     IgM抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)的(de)(de)檢測(ce)(ce)(ce)(ce)用(yong)于傳(chuan)染病的(de)(de)早期診斷(duan)中(zhong)(zhong)(zhong)。間接(jie)法ELISA一般僅(jin)適用(yong)于檢測(ce)(ce)(ce)(ce)總(zong)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)或IgG抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)。如用(yong)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)包(bao)被的(de)(de)間接(jie)法直(zhi)接(jie)測(ce)(ce)(ce)(ce)定(ding)IgM抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)，因標(biao)本中(zhong)(zhong)(zhong)一般同時(shi)存在較高(gao)濃度(du)的(de)(de)IgG抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)，后者將競爭結(jie)合(he)固相(xiang)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)而使一部份IgM抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)不能結(jie)合(he)到(dao)固相(xiang)上(shang)。因此(ci)(ci)如用(yong)抗(kang)(kang)(kang)(kang)人(ren)IgM作(zuo)為二(er)抗(kang)(kang)(kang)(kang)，間接(jie)測(ce)(ce)(ce)(ce)定(ding)IgM抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)，必須先將標(biao)本用(yong)A蛋(dan)白或抗(kang)(kang)(kang)(kang)IgG抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)處理，以除去IgG的(de)(de)干擾。在臨床(chuang)檢驗中(zhong)(zhong)(zhong)測(ce)(ce)(ce)(ce)定(ding)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)IgM時(shi)多采用(yong)捕獲包(bao)被法。先用(yong)抗(kang)(kang)(kang)(kang)人(ren)IgM抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)包(bao)被固相(xiang)，以捕獲血清標(biao)本中(zhong)(zhong)(zhong)的(de)(de)IgM（其中(zhong)(zhong)(zhong)包(bao)括針對(dui)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)的(de)(de)特(te)異(yi)(yi)性IgM抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)和非特(te)異(yi)(yi)性的(de)(de)IgM）。然后加入(ru)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)，此(ci)(ci)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)僅(jin)與(yu)特(te)異(yi)(yi)性IgM相(xiang)結(jie)合(he)。繼而加酶(mei)標(biao)記針對(dui)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)的(de)(de)特(te)異(yi)(yi)性抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)。再與(yu)底(di)物(wu)作(zuo)用(yong)，呈色(se)即與(yu)標(biao)本中(zhong)(zhong)(zhong)的(de)(de)IgM成正相(xiang)關。此(ci)(ci)法常用(yong)于病毒(du)性感染的(de)(de)早期診斷(duan)。甲型(xing)肝炎病毒(du)（HAV）抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)的(de)(de)檢測(ce)(ce)(ce)(ce)模式見圖。

　　類風濕(shi)因(yin)子（RF）同樣能干擾(rao)捕(bu)獲包被法(fa)測定IgM抗(kang)體(ti)，導致假陽性反應。因(yin)此中和IgG的(de)間接法(fa)近來頗受青睞，用(yong)這類試劑檢測抗(kang)CMV IgGM和抗(kang)弓形蟲IgM抗(kang)體(ti)已獲成功(gong)。

說明

1．檢測原理：采用(yong)雙抗體(ti)夾心ABC-ELISA法

2．試劑盒(he)保存：-20℃(較(jiao)長(chang)時(shi)間(jian)不(bu)用時(shi))；2-8℃(頻繁使用時(shi))。

3．濃洗滌液低溫保(bao)存會有鹽析出，稀釋時可在(zai)水(shui)浴中加溫助溶。

4．中(zhong)、英文說(shuo)明書(shu)可能會(hui)有不*之處，請以英文說(shuo)明書(shu)為準(zhun)。

5．剛開啟的(de)酶聯板孔中可能會(hui)含有(you)少許水樣物質(zhi)，此為正常現象，不(bu)會(hui)對實驗結果(guo)造成任(ren)何影響(xiang)。