Elisa試劑(ji)盒詳細資料

中(zhong)文(wen)名(ming)稱：Tn-Ⅰ,大鼠肌(ji)鈣蛋白ⅠELISA試劑(ji)盒(he)技(ji)術指導

組織標(biao)本(ben)(ben)：切割標(biao)本(ben)(ben)后(hou)，稱(cheng)取重量。加入(ru)一定量的(de)PBS，PH7.4。用(yong)(yong)液(ye)氮(dan)迅速冷(leng)凍保存備用(yong)(yong)。標(biao)本(ben)(ben)融(rong)化后(hou)仍(reng)然(ran)保持2-8℃的(de)溫度(du)。加入(ru)一定量的(de)PBS(PH7.4)，用(yong)(yong)手工或(huo)勻漿(jiang)器將標(biao)本(ben)(ben)勻漿(jiang)充分。離(li)心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后(hou)一份待(dai)檢測，其余冷(leng)凍備用(yong)(yong)。標(biao)本(ben)(ben)采集后(hou)盡早進行提(ti)取，提(ti)取按(an)相關文獻(xian)進行，提(ti)取后(hou)應(ying)盡快進行實(shi)驗。

規    格：96T/48T

性    狀：液體(ti)

保    存(cun)：2-8℃

有 效 期(qi)：6個(ge)月

實驗原理

用(yong)純(chun)化(hua)(hua)的(de)(de)抗(kang)(kang)體包被(bei)微(wei)孔板，制成固相載(zai)體，往包被(bei)抗(kang)(kang)該指標(biao)抗(kang)(kang)體的(de)(de)微(wei)孔中(zhong)依次加入(ru)標(biao)本或標(biao)準品(pin)、生物(wu)素化(hua)(hua)的(de)(de)抗(kang)(kang)該指標(biao)抗(kang)(kang)體、HRP標(biao)記(ji)的(de)(de)親和素，經過(guo)*洗滌后用(yong)底物(wu)TMB顯色(se)。TMB在(zai)(zai)過(guo)氧化(hua)(hua)物(wu)酶(mei)的(de)(de)催(cui)化(hua)(hua)下(xia)轉(zhuan)化(hua)(hua)成藍(lan)色(se)，并在(zai)(zai)酸的(de)(de)作用(yong)下(xia)轉(zhuan)化(hua)(hua)成zui終的(de)(de)黃(huang)色(se)。顏色(se)的(de)(de)深淺和樣品(pin)中(zhong)的(de)(de)該指標(biao)呈正相關(guan)。用(yong)酶(mei)標(biao)儀(yi)在(zai)(zai)450nm波長下(xia)測(ce)定吸光度(du)(OD值)，計算樣品(pin)濃度(du)。

類型
　　ELISA可(ke)用(yong)(yong)于(yu)測(ce)(ce)定抗(kang)原，也可(ke)用(yong)(yong)于(yu)測(ce)(ce)定抗(kang)體(ti)(ti)。在這種測(ce)(ce)定方法中有三個必要的(de)試劑：（1）固相的(de)抗(kang)菌素原或(huo)抗(kang)體(ti)(ti)，即"免(mian)疫(yi)吸附劑"（immunosorbent）；（2）酶標記的(de)抗(kang)原或(huo)抗(kang)體(ti)(ti)，稱為"結合物(wu)"（conjugate）；（3）酶反應的(de)底物(wu)。根據(ju)試劑的(de)來源和標本的(de)情況以(yi)及檢(jian)測(ce)(ce)的(de)具體(ti)(ti)條件，可(ke)設計出各種不同類型的(de)檢(jian)測(ce)(ce)方法。用(yong)(yong)于(yu)臨床檢(jian)驗的(de)ELISA主要有以(yi)下幾種類型：

              捕獲包被法測抗體

     IgM抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)的(de)(de)(de)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)用(yong)(yong)于(yu)傳染(ran)(ran)病(bing)的(de)(de)(de)早期診斷(duan)中。間接法(fa)(fa)ELISA一般(ban)僅適用(yong)(yong)于(yu)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)總抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)或IgG抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)。如(ru)用(yong)(yong)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)包被的(de)(de)(de)間接法(fa)(fa)直接測(ce)(ce)定(ding)IgM抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)，因標(biao)本(ben)(ben)中一般(ban)同時存在(zai)較高濃度(du)的(de)(de)(de)IgG抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)，后者將(jiang)競爭結(jie)合(he)固相(xiang)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)而使一部份IgM抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)不能結(jie)合(he)到固相(xiang)上(shang)。因此(ci)如(ru)用(yong)(yong)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)人(ren)IgM作為二抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)，間接測(ce)(ce)定(ding)IgM抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)，必須先將(jiang)標(biao)本(ben)(ben)用(yong)(yong)A蛋白或抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)IgG抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)處理，以除去IgG的(de)(de)(de)干擾。在(zai)臨床檢(jian)(jian)驗中測(ce)(ce)定(ding)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)IgM時多采用(yong)(yong)捕獲包被法(fa)(fa)。先用(yong)(yong)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)人(ren)IgM抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)包被固相(xiang)，以捕獲血清標(biao)本(ben)(ben)中的(de)(de)(de)IgM（其中包括針對(dui)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)的(de)(de)(de)特異(yi)性IgM抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)和非特異(yi)性的(de)(de)(de)IgM）。然(ran)后加入抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)，此(ci)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)僅與(yu)特異(yi)性IgM相(xiang)結(jie)合(he)。繼而加酶(mei)標(biao)記針對(dui)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)的(de)(de)(de)特異(yi)性抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)。再(zai)與(yu)底物作用(yong)(yong)，呈色即與(yu)標(biao)本(ben)(ben)中的(de)(de)(de)IgM成正(zheng)相(xiang)關。此(ci)法(fa)(fa)常(chang)用(yong)(yong)于(yu)病(bing)毒性感染(ran)(ran)的(de)(de)(de)早期診斷(duan)。甲型肝炎病(bing)毒（HAV）抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)的(de)(de)(de)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)模式見(jian)圖。

　　類風濕因(yin)子（RF）同(tong)樣能干擾捕獲包被法測(ce)定(ding)IgM抗體，導致(zhi)假陽性(xing)反應。因(yin)此中和IgG的間接(jie)法近來頗受青睞，用(yong)這類試劑檢測(ce)抗CMV IgGM和抗弓形(xing)蟲(chong)IgM抗體已(yi)獲成功。

說(shuo)明

1．檢(jian)測原理：采用雙抗(kang)體(ti)夾(jia)心ABC-ELISA法

2．試劑盒保存(cun)：-20℃(較長時(shi)間不用(yong)時(shi))；2-8℃(頻繁使用(yong)時(shi))。

3．濃洗滌液低(di)溫保存會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶(rong)。

4．中(zhong)、英(ying)(ying)文(wen)說明(ming)書可能會有不*之(zhi)處，請以英(ying)(ying)文(wen)說明(ming)書為準。

5．剛開啟的酶聯板(ban)孔中可能會含有少許水樣物(wu)質，此為正常現象，不會對實驗結果(guo)造成任何影響。